洋葱dna粗提取的实验原理

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(1)①提取洋葱叶子色素时,研钵中除了加无水乙醇外,还需加入的化学试剂有碳酸钙(保护色素)和二氧化硅(加速研磨).②层析失败最可能的原因是层析时层析液没及滤液细线,色素溶解在层析液中.

(2)观察洋葱根尖细胞有丝分裂时装片制作的压片步骤,目的是使细胞分散开来.显微镜中成像与物体是完全倒置的,中期细胞图位于视野的右上方,所以要观察染色体的形态和数目,应向右上方移动装片.

(3)在利用洋葱提取DNA时在切碎的洋葱中加入一定量的洗涤剂和食盐,洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于DNA的释放;食盐的主要成分是NaCl,有利于DNA的溶解.然后利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同进行提纯.

(4)探究白色洋葱鳞片叶中是否含有脂肪,实验思路是制作洋葱鳞片叶切片,滴加苏丹Ⅲ染液染色并洗去浮色后,在显微镜下观察是否有橘**颗粒出现.

故答案为:

(1)碳酸钙和二氧化硅? 层析时层析液没及滤液细线

(2)使细胞分散开来? 右上

(3)洗涤剂和食盐? 不同浓度的NaCl溶液

(4)制作洋葱鳞片叶切片,滴加苏丹Ⅲ染液染色并洗去浮色后,在显微镜下观察是否有橘**颗粒出现

DNA粗提中,得到血细胞的滤液,为什么不直接加入0.14mol每升的氯化钠溶液,使其他杂质溶解,

DNA粗提取实验原理

1.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl浓度的不同而不同。当NaCl的浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。

2.DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的其他许多物质溶于酒精溶液。利用这一原理,可以进一步提取含杂质较少的DNA。

3.DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色;DNA还有遇甲基绿溶液被染成蓝绿色的特性。上述两种方法均可用于鉴定DNA的存在。

DNA的粗提取与鉴定怎么做!

DNA的粗提取实验原理是0.14mol/L NaCl溶液中DNA溶解度最低,DNA不溶于95%的冷酒精等.用蒸馏水将2mol/LNaCl溶液浓度调制0.14mol/L,析出的是DNA,丢弃的是滤液。

1.DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同,DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大,在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小.酶具有专一性,木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白质类杂质。

2.DNA丝状物溶解在2 mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色。

3.植物细胞有细胞壁保护着,所以用菜花做实验材料时,需要研磨,加入食盐和洗涤剂。

1.DNA的释放:DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。同时,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),于是释放出DNA,当然也有RNA。但是,释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起。

2.将DNA与蛋白质分离:根据二者的特性,即在浓度较高的NaCl溶液(物质的量浓度为2

mol/L)中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在

浓度较高的NaCl溶液中的溶解度很高,Na

与带负电的DNA结合成DNA钠盐。这时DNA在溶液中呈现溶解状态。

3.DNA的析出与获取:利用DNA在浓度较低的NaCl溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的NaCl溶液中加入大量(300

mL)蒸馏水,稀释NaCl溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高(这就是蛋白质的盐溶现象),从而使二者分离。这时,加上不停地搅拌,溶解度下降的DNA逐渐呈丝状物。再通过过滤,滤去蛋白质,就可以获取DNA的黏稠物了。如果采用离心法则更好,用4000

r/min

的旋转频率,离心15

min

,除去上清液(含有蛋白质),留下的沉淀物中含DNA。

4.DNA的再溶解:再用较高浓度的NaCl溶液去溶解DNA黏稠物。

5.DNA的沉淀和浓缩:除去了蛋白质的核酸溶液,必须再进一步沉淀和浓缩。最常用的方法是酒精沉淀法。就是将含有Na

的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。如果出现的丝状物较少,可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分。浓缩后的DNA丝状物,可以用缓缓旋转玻璃棒的方法卷起(因为玻璃棒有吸附DNA的作用)。

6.DNA的鉴定:本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成w—羟基—r酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。

鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。

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