洋葱dna粗提取的实验原理

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DNA的粗提取实验原理是0.14mol/L NaCl溶液中DNA溶解度最低,DNA不溶于95%的冷酒精等.用蒸馏水将2mol/LNaCl溶液浓度调制0.14mol/L,析出的是DNA,丢弃的是滤液。 1.DNA在不同浓度的NaCl溶液中DNA溶解度不同,DNA在2mol/LNaCl溶液中溶解度最大,在0.14mol/LNaCl溶液中溶解度最小.酶具有专一性,木瓜蛋白酶可以水解DNA中的蛋白质类杂质。 2.DNA丝状物溶解在2 mol/LNaCl溶液中,加入二苯胺试剂后需要沸水浴才会呈现蓝色。 3.植物细胞有细胞壁保护着,所以用菜花做实验材料时,需要研磨,加入食盐和洗涤剂。

植物DNA提取的原理和方法是什么?

1.DNA的释放:DNA位于鸡血细胞的细胞核中,正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来,实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说,是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞破裂。同时,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),于是释放出DNA,当然也有RNA。但是,释放出来的大量DNA和RNA往往与蛋白质结合在一起。

2.将DNA与蛋白质分离:根据二者的特性,即在浓度较高的NaCl溶液(物质的量浓度为2

mol/L)中,核蛋白容易解聚,游离出DNA。而DNA在

浓度较高的NaCl溶液中的溶解度很高,Na

与带负电的DNA结合成DNA钠盐。这时DNA在溶液中呈现溶解状态。

3.DNA的析出与获取:利用DNA在浓度较低的NaCl溶液中溶解度小的原理,向含有DNA的浓度较高的NaCl溶液中加入大量(300

mL)蒸馏水,稀释NaCl溶液,使DNA的溶解度下降,而蛋白质的溶解度增高(这就是蛋白质的盐溶现象),从而使二者分离。这时,加上不停地搅拌,溶解度下降的DNA逐渐呈丝状物。再通过过滤,滤去蛋白质,就可以获取DNA的黏稠物了。如果采用离心法则更好,用4000

r/min

的旋转频率,离心15

min

,除去上清液(含有蛋白质),留下的沉淀物中含DNA。

4.DNA的再溶解:再用较高浓度的NaCl溶液去溶解DNA黏稠物。

5.DNA的沉淀和浓缩:除去了蛋白质的核酸溶液,必须再进一步沉淀和浓缩。最常用的方法是酒精沉淀法。就是将含有Na

的DNA溶液,加入到相当于其两倍体积的体积分数为95%冷酒精溶液中,混匀以后可以使DNA沉淀、浓缩,形成含杂质较少的DNA丝状物,悬浮于溶液中。如果出现的丝状物较少,可以将此混合液再放入冰箱中冷却几分。浓缩后的DNA丝状物,可以用缓缓旋转玻璃棒的方法卷起(因为玻璃棒有吸附DNA的作用)。

6.DNA的鉴定:本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。二苯胺法的原理是:DNA中嘌呤核苷酸上的脱氧核糖遇酸生成w—羟基—r酮基戊醛,它再和二苯胺作用而显现蓝色(溶液呈浅蓝色)。

鉴定时溶液蓝色的深浅,与溶液中DNA含量的多少有关。

洋葱实验滴加碘液作用

原理就是去掉植物细胞壁

细胞膜

质体

线粒体

叶绿体

剩下细胞核了。就是DNA了。

通常采用机械研磨的方法破碎植物的组织和细胞,由于植物细胞匀浆含有多种酶类(尤其是氧化酶类)对DNA的抽提产生不利的影响,在抽提缓冲液中需加入抗氧化剂或强还原剂(如巯基乙醇)以降低这些酶类的活性。在液氮中研磨,材料易于破碎,并减少研磨过程中各种酶类的作用。

十二烷基肌酸钠(sarkosyl)、十六烷基三甲基溴化铵(hexadyltrimethyl

ammomum

bromide,简称为CTAB)、十二烷基硫酸钠(sodium

dodecyl

sulfate,简称SDS)等离子型表面活性剂,能溶解细胞膜和核膜蛋白,使核蛋白解聚,从而使DNA得以游离出来。再加入苯酚和氯仿等有机溶剂,能使蛋白质变性,并使抽提液分相,因核酸(DNA、RNA)水溶性很强,经离心后即可从抽提液中除去细胞碎片和大部分蛋白质。上清液中加入无水乙醇使DNA沉淀,沉淀DNA溶于TE溶液中,即得植物总DNA溶液

洋葱实验滴加碘液作用介绍如下:

在洋葱实验中,滴加碘液的作用是染色,使细胞核、液泡和细胞质更为清楚。

具体操作是:在盖玻片一侧滴加一滴碘液,在另一侧用吸水纸吸去盖玻片下的水分,将染液引入其中,使材料着色,有时染色不匀,也可先把盖玻片取下,用吸水纸吸去材料周围的水,然后滴加一滴碘液,几分钟后,加盖玻片进行观察。此时细胞质呈浅**,细胞核呈较深的**。

高中生物中洋葱可用来做哪些实验

高中生物中洋葱可用来做如下试验:

1.观察植物细胞的结构;2.观察DNA和RNA在细胞中的分布;3.检测生物组织中的还原糖;4.观察植物细胞的质壁分离和复原;5.叶绿体中色素的提取和分离;6.观察根尖分生组织细胞的有丝分裂;7.染色体数目的变春键化实验;8.DNA的粗提取。

洋葱,别笑春名球葱、圆葱、玉葱、葱头、荷兰葱、皮牙子等扒升巧,百合科、葱属二年生草本植物。洋葱含有前列腺素A,能降低外周血管阻力,降低血粘度,可用于降低血压、提神醒脑、缓解压力、预防感冒。

此外,洋葱还能清除体内氧自由基,增强新陈代谢能力,抗衰老,预防骨质疏松,是适合中老年人的保健食物。 洋葱在中国分布广泛,南北各地均有栽培,是中国主栽蔬菜之一。中国的洋葱产地主要有福建、山东、甘肃、内蒙古、新疆等地。

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