借由虫子进行dna鉴定

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(1)破碎细胞的步骤中需加入一定量的洗涤剂和食盐对洋葱组织进行处理,加入前者是为了瓦解细胞膜结构,加入后者的目的是溶解DNA.

(2)①滤液中NaCl浓度在0.14mol/L时可分离出DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在2mol/L的NaCl溶液中;

②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能破坏其中的蛋白质;

③将得到的DNA粗提取物放在60~75℃水浴中保温10~15min,蛋白质被破坏,但仍能得到纯度较高的DNA,说明了DNA具有较高的稳定性(或耐较高温度).

(3)步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是析出DNA,依据的原理是DNA不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与DNA分离.得到纯净的DNA后,可利用DNA与二苯胺在沸水浴条件下发生显色反应,来对其进行鉴定.

故答案为:

(1)食盐(氯化钠)溶解DNA

(2)①2(1分)②破坏其中的蛋白质③具有较高的稳定性(或耐较高温度)

(3)析出DNA?DNA不溶于酒精,但酒精可以使蛋白质变性并与DNA分离?二苯胺

洗涤剂是如何瓦解细胞膜的?

植物组织提取基因组DNA

一、材料

幼嫩叶子。

二、设备

移液器,冷冻高速离心机,台式高速离心机,水浴锅,陶瓷研钵,50ml离心管(有盖)及5ml和1.5ml离心管,弯成钩状的小玻棒。

三、试剂

1、提取缓冲液Ⅰ:100mmol/L Tris·Cl, pH8.0, 20mmol/L EDTA, 500mmol/L NaCl, 1.5% SDS。

2、提取缓冲液Ⅱ:18.6g葡萄糖,6.9g二乙基二硫代碳酸钠,6.0gPVP,240ul巯基乙醇,加水至300ml。

3、80:4:16/氯仿:戊醇:乙醇

4、 RnaseA母液

5、其它试剂:液氮、异丙醇、TE缓冲液,无水乙醇、70%乙醇、3mol/L NaAc。

四、操作步骤:

1. 在50ml离心管中加入20ml提取缓冲液Ⅰ, 60℃水浴预热。

2. 幼苗或叶子5-10g, 剪碎, 在研钵中加液氮磨成粉状后立即倒入预热的离心管中, 剧烈摇动混匀, 60℃水浴保温30-60分钟(时间长,DNA产量高), 不时摇动。

3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 颠倒混匀(需带手套, 防止损伤皮肤),室温下静置5-10分钟, 使水相和有机相分层(必要时可重新混匀)。

4. 室温下5000rpm离心5分钟。

5. 仔细移取上清液至另一50ml离心管,加入1倍体积异丙醇,混匀,室温放置片刻即出现絮状DNA沉淀。

6. 在1.5ml eppendorf中加入1ml TE。用钩状玻璃棒捞出DNA絮团,在干净吸水纸上吸干,转入含TE的离心管中,DNA很快溶解于TE。

7. 如DNA不形成絮状沉淀,则可用5000rpm离心5分钟, 再将沉淀移入TE管中。这样收集的沉淀,往往难溶解于TE,可在60℃水浴放置15分钟以上,以帮助溶解。

8. 将DNA溶液3000rpm离心5分钟, 上清液倒入干净的5ml离心管。

9. 加入5μl RNaseA(10μg/μl), 37℃ 10分钟, 除去RNA(RNA对DNA的操作、分析一般无影响,可省略该步骤)。

10. 加入1/10体积的3mol/L NaAc及2×体积的冰乙醇,混匀,-20℃放置20分钟左右,DNA形成絮状沉淀。

11. 用玻棒捞出DNA沉淀,70%乙醇漂洗,再在干净吸水纸上吸干。

12. 将DNA重溶解于1ml TE, -20贮存。

13. 取2μl DNA样品在0.7% Agarose胶上电泳, 检测DNA的分子大小。同时取15μl稀释20倍, 测定OD260/OD280, 检测DNA含量及质量。

[注意] 5g样品可保证获得500μg DNA, 足供RFLP、PCR等分析之用。

DNA的粗提取中酒精的浓度意义和使用需要注意什么

洗涤剂是“双亲”分子(既有亲油性又有亲水性),细胞膜也是这样的分子,洗涤剂能使细胞膜被乳化,造成细胞膜被破坏,细胞解体。

洗涤剂对细胞内的膜系统都有损害,只是细胞膜在细胞的最表面,最容易受害。

洗涤剂的作用原理,主要是:减少表面张力,乳化。如果是加酶洗涤剂,所加的一般都是蛋白酶,因为乳化作用只对脂质有效。

细胞膜的基本骨架就是磷脂双分子层,在水中自动排列成头部在两侧的双分子层。

扩展资料:

提取洋葱DNA时,需加入洗涤剂和食盐,其中洗涤剂的作用是瓦解细胞膜;

分离动物细胞内的各种物质时,要先让细胞吸水胀破,再用差速离心法分离;

电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、性状的不同,使带电分子产生不同的迁移速度,从而实现样品中各种分子的分离.因此可用电泳法将蛋白质、DNA、RNA等生物大分子分离;

提取和分离叶绿体色素所用的试剂有无水乙醇、二氧化硅,二氧化碳、层析液,其中无水乙醇的作用是提取色素;二氧化硅的作用是使研磨更充分;碳酸钙的作用是防止色素被破坏;层析液用于分离色素;

按组成元素分:

构成细胞膜的成分有磷脂,糖蛋白,糖脂和蛋白质。

按组成结构分:

磷脂双分子层是构成细胞膜的的基本支架。细胞膜的主要成分是蛋白质和脂质,含有少量糖类。其中部分脂质和糖类结合形成糖脂,部分蛋白质和糖类结合形成糖蛋白。

化学组成:

细胞膜主要由脂质、蛋白质和糖类等物质组成;其中以蛋白质和脂质为主。在电镜下可分为三层,即在膜的靠内外两侧各有一条厚约2.5nm的电子致密带;

中间夹有一条厚2.5nm的透明带,总厚度约7.0~7.5nm左右这种结构不仅见于各种细胞膜,细胞内的各种细胞器膜如:线粒体、内质网等也具有相似的结构。

参考资料:

百度百科-洗涤剂

参考资料:

百度百科-细胞膜

参考资料:

百度百科-DNA提取

DNA的粗提取中酒精的浓度意义和使用需要注意什么

1、在鉴定脂肪的实验中,要用50%的酒精洗去浮色;

2、在叶绿体中色素的提取中利用无水乙醇作为有机溶解提取色素;

3、观察洋葱根尖有丝分裂中解离液中有95%的酒精;

4、DNA粗提中要95%的冷酒精去除其他有机杂质;

5、在消毒的时候使用70%的酒精杀菌效果最好,如果是对刚洗刷后未干的器皿则可选择75%的酒精进行消毒.

6、对于在腐乳的制作中,酒精的含量控制在12%左右,这个不是浓度啊,

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